巴瑞替尼在脂多糖诱导的小鼠急性肺损伤中的作用及机制

作者：张璐璐; 王斌; 李薇蕾; 梁冬^*

来源：中国病理生理杂志, 2023, 39(03): 471-478.

• 脓毒症
• 急性肺损伤
• 巴瑞替尼
• 炎症
• JAK-STAT信号通路

目的：研究巴瑞替尼在脂多糖诱导的小鼠急性肺损伤中的作用及机制。方法：将40只成年雄性C57BL/6小鼠，随机分成3组：对照组（10只）、脂多糖组（15只）和脂多糖+巴瑞替尼组（15只）。腹腔注射脂多糖，建立小鼠脓毒症模型。脂多糖注射后，每12 h灌胃巴瑞替尼（10 mg/kg），观察并记录48 h内各组小鼠生存情况。脂多糖注射48 h后留取支气管肺泡灌洗液（bronchoalveolar lavage fluid, BALF），检测BALF中的细胞总数。HE染色和免疫组化检测小鼠肺组织大体形态和炎症细胞浸润情况。ELISA检测小鼠血浆和支气管肺泡灌洗液中炎症因子肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α, TNF-α)、白细胞介素1β(interleukin-1β, IL-1β)和IL-6的水平。Western blot检测小鼠肺组织中Janus激酶（Janus kinase, JAK）-信号转导及转录激活因子（signal transducer and activator of transcription, STAT）通路相关蛋白的表达水平。流式细胞术检测小鼠肺组织中巨噬细胞比率和分型。培养小鼠巨噬细胞，予以不同浓度巴瑞替尼干预，脂多糖孵育后，Western blot检测各组巨噬细胞JAK-STAT通路相关蛋白表达水平。结果：与对照组相比，脂多糖组小鼠48 h生存率33.3%,BALF中细胞总数显著增加（P<0.05）,HE染色可见肺泡水肿和塌陷，肺泡间隔增厚且可见大量炎症细胞浸润，免疫组化可见肺泡间隔大量巨噬细胞浸润（P<0.05）。ELISA检测见脓毒症小鼠血浆和肺泡冲洗液TNF-α、IL-1β和IL-6表达水平显著升高（P<0.05）,Western blot检测可见肺组织中JAK-STAT通路相关蛋白表达显著上调（P<0.05），流式检测可见肺组织M1型巨噬细胞比率显著上调（P<0.05）。与脂多糖组相比，脂多糖+巴瑞替尼组小鼠生存率提高，上述病理生理学改变得到改善（P<0.05）。细胞实验中，LPS诱导巨噬细胞JAK-STAT通路相关蛋白表达显著上调（P<0.05），而巴瑞替尼呈剂量依耐性地抑制JAKSTAT通路激活（P<0.05）。结论：巴瑞替尼通过抑制JAK-STAT通路，减轻小鼠肺部组织炎症，从而减轻脓毒症急性肺损伤。