科研之友
微信
新浪微博
Facebook
分享链接
摘要
目的研究miR-433-3p对卵巢癌细胞生物学行为的影响, 并探究其相关分子机制, 以期为卵巢癌的早期诊断和治疗提供新的方向。方法生物信息学及数据库分析miR-433-3p在卵巢癌中的表达模式, 并利用实时荧光定量聚合酶链式反应(real-time fluorescence quantitative PCR, qPCR)方法检测其在卵巢癌细胞中的表达;分别将miR-433-3p mimic和inhibitor及其阴性对照转染到卵巢癌细胞系A2780和SKOV3中, 分为miR-433-3p inhibitor组、inhibitor NC组、miR-433-3p mimic组和mimic NC组。EdU增殖实验、克隆形成实验、Transwell迁移和侵袭等体外功能学实验检测miR-433-3p对卵巢癌生物学行为的影响;裸鼠体内实验检测miR-433-3p对卵巢癌细胞成瘤能力的影响;数据库预测miR-433-3p可能作用的靶基因, 并通过双萤光素酶报告实验、qPCR以及Western blot实验进一步验证miR-433-3p对靶基因及其所在分子通路的调控作用。结果相对于正常卵巢组织, miR-433-3p在卵巢癌组织中低表达。抑制miR-433-3p的表达可以促进卵巢癌细胞的增殖、迁移、侵袭以及对卡铂的耐药性(t值分别为4.92、5.52、3.02、3.77、5.99、4.03, P值均<0.05);而过表达miR-433-3p具有相反的作用(t值分别为5.56、4.15、2.30、3.38、7.69、2.68, P值均<0.05)。裸鼠体内实验证实miR-433-3p能够明显抑制卵巢癌细胞皮下成瘤能力(t值分别为3.78、2.26、3.46、2.65, P值均<0.05)。通过数据库预测和双萤光素酶报告实验等证实丝裂原活化蛋白激酶8(mitogen-activated protein kinase 8, MAPK8)和生长因子受体结合蛋白2(growth factor receptor-bound protein 2, GRB2)是miR-433-3p的靶基因。MAPK8和GRB2蛋白在卵巢癌组织中表达上调, 与miR-433-3p表达趋势相反, MAPK8和GRB2的高表达与卵巢癌患者的不良预后密切相关。此外, miR-433-3p还可调控MAPK信号通路相关蛋白的表达。结论 miR-433-3p可能通过靶向结合MAPK8和GRB2, 抑制其表达, 调控下游MAPK信号通路, 从而抑制卵巢癌的进展。
- 单位
