伪狂犬病病毒Ea株UL6基因的克隆、序列分析及表达

作者:薛念波; 肖少波; 江云波; 梅小伟; 刘曼莉; 赵骞; 罗锐; 陈焕春; 方六荣
来源:动物医学进展, 2007, (12): 1-5.
DOI:10.16437/j.cnki.1007-5038.2007.12.024

摘要

以伪狂犬病病毒Ea株基因组DNA为模板,通过PCR扩增UL6全长基因,将PCR产物克隆于pMD18-T载体,并采用双脱氧终止法进行序列测定。序列分析显示UL6全长1 938 bp,可编码646个氨基酸。将该基因克隆到插入原核表达载体pET28a的6×His下游,获得原核表达质粒pET28a-UL6,转化大肠埃希菌BL21,经IPTG诱导在大肠埃希菌中成功表达获得分子质量约70 ku的融合表达蛋白6×His-UL6,Western blot证实,表达的融合蛋白能与抗6×His的单克隆抗体发生特异性反应。根据测定的序列,设计一对能扩增UL6基因完整编码区的引物,PCR扩增UL6基因并将其插入真核表...

  • 单位
    农业微生物学国家重点实验室

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