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摘要
为开发能高效降解游离棉酚的酶蛋白。从土壤中筛选得到一株Bacillus amyloliquefaciens XP-13，从其基因组扩增获得了基因BmLac，进而构建Ppic9k-BmLac重组质粒，将其导入毕赤酵母GS115实现了异源表达，对漆酶BmLac的酶学特性、棉酚降解效果进行研究。结果表明，以ABTS为底物时，该酶的最适反应条件为pH 4,55℃，最适条件下酶活是101.56 U/mL；在90℃下孵育1 h后，相对酶活仍保留70%以上；在pH 3-7孵育1 h，其相对酶活均保留96%以上。1 mmol/L的Cu2+能使该酶酶活提高1.93倍，但高浓度(10 mmol/L)的Fe2+、Fe3+和Al3+完全抑制该酶活性。在55℃下反应2 h后，该酶对棉酚的降解率高达94.57%(无介体)和98.73%(有ABTS)。综上，漆酶BmLac具有良好的热稳定性和广泛的pH适应性，并能有效降解棉酚，该酶为有效降解棉籽粕中的游离棉酚提供基础支撑。
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单位生命科学学院; 云南师范大学
