IL-36在冠状动脉粥样硬化性心脏病患者中的表达及其对CD8+T细胞的功能调控

作者：张芙成; 苏淑红; 常丹阳; 陈云玲; 马怀敏; 陈敬芝; 王志方^*

来源：中华微生物学和免疫学杂志, 2023, 43(06).

• 冠状动脉粥样硬化性心脏病
• IL-36
• CD8+T淋巴细胞

目的观察IL-36家族成员在冠状动脉粥样硬化性心脏病(coronary atherosclerotic heart disease, CAHD)患者中的表达谱, 探讨外源性IL-36对CAHD患者CD8+T细胞功能的调控作用。方法研究对象为20例对照者和82例CAHD患者。CAHD患者包括稳定性心绞痛(stable angina pectoris, SAP)患者31例、不稳定性心绞痛(unstable angina pectoris, UAP)患者27例、急性心肌梗死(acute myocardial infarction, AMI)患者24例。采集抗凝外周血, 分离血浆和外周血单个核细胞, ELISA法检测血浆IL-36α、IL-36β、IL-36γ和IL-36受体拮抗剂(IL-36 receptor antagonist, IL-36RA)水平, 分选CD8+T细胞, 实时定量PCR法检测CD8+T细胞中IL-36受体亚基mRNA相对表达量, 流式细胞术检测CD8+T细胞中程序性死亡受体-1(programmed death-1, PD-1)、细胞毒性淋巴细胞相关蛋白-4(cytotoxic T lymphocytes associated protein-4, CTLA-4)、淋巴细胞活化基因-3(lymphocyte-activation gene-3, LAG-3)表达水平, ELISA法检测CD8+T细胞培养上清中穿孔素、颗粒酶B、颗粒溶素、IFN-γ、TNF-α水平。使用重组人IL-36RA刺激对照者和AMI患者分选CD8+T细胞, 比较刺激前后免疫检查点分子表达、毒性分子和细胞因子分泌差异。组间比较采用单因素方差分析或配对t检验。结果血浆IL-36α、IL-36β和IL-36γ水平在对照组、SAP组、UAP组和AMI组之间的差异无统计学意义(P>0.05);AMI组血浆IL-36RA水平显著低于对照组、SAP组和UAP组[(1 159.57±297.83) pg/ml与(1 773.47±754.29) pg/ml、(1 600.12±740.48) pg/ml和(1 578.72±720.42) pg/ml, P<0.05]。CD8+T细胞中IL-1受体6(IL-1 receptor 6, IL-1R6)和IL-1受体辅助蛋白(IL-1 receptor accessory protein, IL-1RAcP)mRNA相对表达量、PD-1和CTLA-4的表达、IFN-γ和TNF-α分泌水平在4组之间的差异无统计学意义(P>0.05)。AMI组CD8+T细胞分泌穿孔素、颗粒酶B、颗粒溶素的水平高于对照组、SAP组和UAP组(P<0.05)。重组人IL-36RA刺激不影响对照者CD8+T细胞免疫检查点分子表达以及毒性分子、细胞因子分泌(P>0.05)。重组人IL-36RA刺激后, AMI患者PD-1+CD8+T细胞比例升高(P=0.033), 但CTLA-4+CD8+T细胞比例差异无统计学意义(P=0.288)。重组人IL-36RA刺激后, AMI患者CD8+T细胞分泌穿孔素、颗粒酶B、颗粒溶素的水平显著降低(P<0.05), 但IFN-γ和TNF-α分泌水平差异无统计学意义(P>0.05)。结论 AMI患者中IL-36RA水平降低可能促进CD8+T细胞分泌毒性分子, 增强CD8+T细胞活性, 参与AMI发病。

• 单位
  新乡医学院; 新乡市中心医院