自噬调控脂多糖诱导的巨噬细胞炎症因子水平

作者：任彩瑗; 张向颖; 时红波; 陈德喜; 段钟平; 张桓虎; 任锋

来源：细胞与分子免疫学杂志, 2017, 33(05): 581-585.

DOI：10.13423/j.cnki.cjcmi.008126

• 细胞自噬
• 脂多糖
• 炎症反应
• 巨噬细胞

目的探讨细胞自噬调控对脂多糖(LPS)刺激巨噬细胞引发炎症反应的影响及其分子机制。方法分离小鼠骨髓间充质干细胞,经过诱导分化获得骨髓来源的巨噬细胞,通过LPS刺激巨噬细胞建立炎症反应细胞模型。利用绿色荧光蛋白-微管相关蛋白1轻链3(GFP-LC3)质粒转染观察自噬体的形成;利用3-甲基腺嘌呤(3-MA)和雷帕霉素(Rap)分别抑制和促进细胞自噬,研究自噬干预对LPS诱导巨噬细胞炎症反应的影响;实时定量PCR检测LC3B、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素1β(IL-1β)、IL-6和IL-12p40的mRNA水平,Western blot法检测LC3B、核因子κB(NF-κB)、NF-κB抑制蛋白α(IκBα)的蛋白水平。结果 LPS刺激巨噬细胞2、4、6 h,诱导巨噬细胞LC3B mRNA和蛋白高表达,巨噬细胞中自噬体增加。与单独LPS刺激相比,3-MA可抑制细胞自噬,显著增加炎症因子TNF-α、IL-1β、IL-6和IL-12p40 mRNA表达,而Rap处理减少自噬数量,降低TNF-α、IL-1β、IL-6和IL-12p40 mRNA水平;自噬抑制后,可通过降低IκBα和增加p-NF-k Bp65的表达而影响NF-κB信号通路,进而调节炎症细胞因子表达。结论自噬可调控LPS刺激巨噬细胞引起的炎症反应。

• 单位
  第二临床医学院; 首都医科大学附属北京佑安医院; 山西医科大学