猪CD150真核表达载体的构建及其在Marc-145细胞中的稳定表达

作者：张兰; 梁婉; 周丹娜; 杨克礼; 郭锐; 李鹏^*; 田永祥^*

来源：湖北农业科学, 2021, 60(05): 149-151.

DOI：10.14088/j.cnki.issn0439-8114.2021.05.029

• 猪
• 淋巴细胞刺激因子(CD150)
• 真核表达

试验克隆获得了猪全长CD150基因序列,将其连接到真核表达载体pEGFP-N1上获得重组载体pEGFP-N1-CD150。通过测序、Western-blot、瞬时转染,确认了pEGFP-N1-CD150的表达效果。结果表明,pEGFP-N1-CD150载体测序结果与CD150基因序列比对率100%;Marc-145细胞密度在70%～80%时质粒转染效果最佳,24 h为转染高峰期,绿色荧光最强;Western-blot鉴定到分子质量约为80 kDa的蛋白,与预期大小符合,表明CD150蛋白成功表达。

• 单位
  长江大学; 动物科学学院; 湖北省农业科学院畜牧兽医研究所