本发明公开了一种制备高效水解活力施氏假单胞菌的细胞固定化方法,该方法是以海藻酸钠和聚乙烯醇(PVA)为基体,与施氏假单胞菌菌体的生理盐水悬浮液混合,混匀后注入CaCl2溶液中,固化得到。本发明所述的施氏假单胞菌细胞固定化方法工艺简单,固定化细胞颗粒机械强度高,弹性好,水解活性高,在反应体系中耐受性强。本发明方法得到一种新型的具有高效水解活力的固定化施氏假单胞菌细胞催化剂。