EZH2基因表达对ox-LDL诱导内皮细胞炎症反应的影响

作者：李扬; 林飞; 陈志刚; 常峥峥; 赵奕霖; 李东旭; 李雪芳; 孙四玉; 赵国安^*

来源：山东医药, 2021, 61(23): 10-32.

• 动脉粥样硬化
• 内皮细胞
• 炎症
• EZH2
• ox-LDL
• TNF-α
• e-NOS
• IL-8
• IL-6
• CRP

目的观察Zeste同源复合物2(EZH2)基因表达对氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导内皮细胞炎症反应的影响。方法培养人脐静脉内皮细胞(HUVEC),加入不同浓度(0、25、50、100μg/mL)ox-LDL作用12、24 h,采用ELISA法检测细胞上清白细胞介素6(IL-6)水平;结果显示,100μg/mL ox-LDL作用后上清IL-6水平升高最明显(P均<0.05),因0μg/mL ox-LDL作用24 h后上清IL-6水平升高,故选择100μg/mL ox-LDL作用12 h作为后续实验条件。将HUVEC分为两部分,一部分分为实验A组(EZH2腺病毒+100μg/mL ox-LDL)、阳性对照A组(对照腺病毒+100μg/mL ox-LDL)、阴性对照A组(100μg/mL ox-LDL)及空白A组(未处理),另一部分分实验B组(EZH2特异性抑制剂GSK126+100μg/mL ox-LDL)、阳性对照B组(1%DMSO+100μg/mL ox-LDL)、阴性对照B组(100μg/mL oxLDL)及空白B组(未处理),均作用12 h。采用Western blotting法检测细胞EZH2蛋白表达,ELISA法检测上清IL-6水平,Real-time PCR法检测细胞EZH2及IL-6、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、一氧化氮合酶(e-NOS)、IL-8、C反应蛋白(CRP)mRNA表达。结果与空白A组比较,实验A组细胞EZH2 mRNA、蛋白表达明显升高(P均<0.05),阳性对照A组、阴性对照A组细胞EZH2 mRNA、蛋白表达无明显变化(P均>0.05)。与空白A组比较,实验A组、阳性对照A组、阴性对照A组上清IL-6水平及细胞TNF-α、e-NOS、IL-8 mRNA表达均升高,实验A组升高更明显(P均<0.05)。与空白B组比较,实验B组细胞EZH2 mRNA、蛋白表达明显降低(P均<0.05),阳性对照B组、阴性对照B组细胞EZH2 mRNA、蛋白表达无明显变化(P均>0.05)。与空白B组比较,实验B组、阳性对照B组、阴性对照B组上清IL-6水平及细胞TNF-α、e-NOS、IL-8 mRNA表达均升高,阳性对照B组、阴性对照B组升高更明显(P均<0.05)。各组细胞CRP mRNA表达比较均无统计学差异(P均>0.05)。结论 EZH2过表达可通过靶向调节炎症因子TNF-α、eNOS、IL-8、IL-6而促进ox-LDL诱导内皮细胞炎症反应,抑制EZH2表达则具有相反作用。