稳定转染短发夹状RNA后子宫颈癌细胞中人乳头状瘤病毒18型E6基因表达的变化

作者：陶光实; 张克强; 陈勇; 聂妹芳; 刘风英; 吴宜林; 刘毅智; 吴秀山

来源：中华妇产科杂志, 2005, (10): 49-52.

• RNA干扰
• 宫颈肿瘤
• 转染
• 癌基因蛋白质类
• 病毒性 RNA interference
• Cervix neoplasms
• Transfection
• Oncogene proteins
• viral

目的探讨宫颈癌细胞株HeLa细胞稳定转染表达短发夹状RNA(shRNA)的质粒后,HeLa细胞中人乳头状瘤病毒18型E6基因(HPV18E6)表达的变化。方法实验组将本实验室前期构建的可遗传性表达HPV18E6shRNA的pE6-1shRNA质粒和含E6基因突变点的pE6-2shRNA质粒分别转染HeLa细胞,对照组以空质粒pSUPER和不加质粒的脂质体分别转染HeLa细胞。稳定转染后,氨基糖苷抗生素(G418)筛选阳性细胞克隆,RT-PCR技术和免疫组化链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶连接(SP)法分别检测HeLa细胞中HPV18E6mRNA和蛋白表达的变化。结果稳定转染后,G418筛选,实验...

• 单位
  湖南师范大学; 中南大学湘雅二医院; 湖南省计划生育研究所