TF/FⅦa体外诱导大肠癌LOVO细胞系表达MMP-7mRNA的研究

作者：张剑权; 万远廉; 刘玉村; 汪欣; 汤坚强; 吴涛; 朱静; 潘义生

来源：中华普通外科杂志, 2007, 22(12): 918-921.

DOI：10.3760/j.issn:1007-631X.2007.12.012

• 结直肠肿瘤
• 肿瘤转移
• 活性凝血7因子
• MMP-mRNA
• P38

目的观察组织因子/活性凝血七因子(TF/FⅦa)诱导大肠癌 LOVO 细胞系表达基质金属蛋白酶7(MMP-7)mRNA 及信号传导途径。方法构建靶向组织因子基因干扰的 RNAi 质粒并稳定转染 LOVO 细胞获得 TFRNAi LOVO 细胞系,Western blot 检测干扰效率;RT-PCR 观察100 nmol/L FⅦa刺激0、4、8、12、24 h 后 LOVO 细胞中 MMP-7mRNA 的变化,Northern blot 证实时间效应及测定0、10、50、100、200 nmol/L FⅦa刺激后的 MMP-7mRNA 水平;100 nmol/L FⅦa分别刺激LOVO 细胞0、4、8、12、16、24 h,Western blot 测定 p-P38的水平;Northern blot 分别检测预先使用10 mmol/L P38阻断剂 SB203580 0.5 h 再以100 nmol/L FⅦa刺激 LOVO 细胞8 h 及100 nmol/L FⅦa刺激 TFRNAi LOVO 细胞系8 h 后 MMP-7mRNA 水平。结果 Northern blot 结果显示 FⅦa刺激MMP-7mRNA 表达存在时间、浓度依赖性;Western blot 测定 FⅦa刺激 p-P38表达存在时间依赖性。应用 P38通路阻断剂 SB203580后 MMP-7mRNA 基因表达下降59.2%,转染组织因子干扰质粒的LOVO 细胞中,MMP-7mRNA 的表达水平较 LOVO 细胞组下降48%。结论活性Ⅶ因子与组织因子结合诱导体外大肠癌 LOVO 细胞系表达 MMP-7mRNA,其机理可能与 P38通路有关。

• 单位
  北京大学第一医院