色胺酮对小鼠血小板聚集和释放功能的影响及机制

作者：田晓云; 袁兆伟; 郭芳; 熊秀琴; 任天和; **; 罗俊^*

来源：贵州医科大学学报, 2023, 48(01): 11-42.

DOI：10.19367/j.cnki.2096-8388.2023.01.002

• 色胺酮
• 胶原
• 血小板
• 聚集
• 释放
• 信号通路

目的 探讨色胺酮对小鼠血小板聚集、释放功能的影响及机制。方法 取昆明(KM)种小鼠10只麻醉采血制备富血小板血浆(PRP)和贫血小板血浆(PPP)，再取KM小鼠50只采用多次离心法制备洗涤血小板、制成悬液后分为对照组[1‰二甲基亚砜(DMSO)]、5μmol/L色胺酮组、10μmol/L色胺酮组及0.5 mg/L替罗非班组，除对照组外其余各组小鼠洗涤血小板(或PRP)悬液分别与对应药物孵育，再加3种激动剂[2 mg/L胶原、80 U/L凝血酶及5μmol/L二磷酸腺苷(ADP)]，以台式缓冲液(或PPP)作空白对照，采用光比浊法检测3种激动剂刺激下对照组、5μmol/L色胺酮组、10μmol/L色胺酮组及0.5 mg/L替罗非班组小鼠血小板的聚集情况并计算血小板聚集率，采用荧光强度法检测2 mg/L胶原刺激后对照组、10μmol/L色胺酮组及0.5 mg/L替罗非班组小鼠血小板三磷酸腺苷(ATP)的释放功能，采用Western blot检测空白组、对照组、5μmol/L色胺酮组、10μmol/L色胺酮组及0.5 mg/L替罗非班组小鼠血小板中磷酸酰肌醇-3-激酶(PI3K)、蛋白激酶B (PKB或Akt)、糖原合成酶激酶(GSK) 3β及蛋白激酶C(PKC)蛋白磷酸化的表达水平。结果 胶原刺激血小板聚集时，5、10μmol/L色胺酮组及0.5 mg/L替罗非班组小鼠血小板的聚集率较对照组降低(P <0.05或P <0.01); ADP和凝血酶刺激血小板聚集时，5、10μmol/L色胺酮组小鼠血小板的聚集率与对照组比较，差异无统计学意义(P> 0.05);胶原刺激时，10μmol/L色胺酮组和0.5 mg/L替罗非班组小鼠血小板的ATP释放量较对照组降低(P <0.01);胶原诱导的血小板聚集后，5、10μmol/L色胺酮组及0.5 mg/L替罗非班组小鼠血小板中PI3K(p85)、Akt、GSK3β蛋白以及PKC蛋白底物的磷酸化水平较对照组减少(P <0.01)。结论 色胺酮可以抑制小鼠血小板的聚集和释放功能，其机制可能与抑制PI3K-Akt-GSK3β和PKC蛋白的磷酸化水平有关。

• 单位
  基础医学院; 贵州医科大学