新型融合蛋白——蛋白转导结构域4-超氧化物歧化酶1减轻大鼠心肌缺血/再灌注损伤的实验研究

作者：陈靖宜; 龚小芳; 李清; 刘菊英^*

来源：国际麻醉学与复苏杂志, 2021, 42(11).

• 蛋白转导结构域
• 融合蛋白
• 心肌
• 缺血/再灌注损伤
• 肌酸激酶
• 乳酸脱氢酶

目的研究新型融合蛋白——蛋白转导结构域(protein transduction domain, PTD)4-超氧化物歧化酶(superoxide dismutase, SOD)1对心肌缺血/再灌注损伤(myocardial ischemia/reperfusion injury, MI/RI)大鼠肌酸激酶(creatine kinase, CK)、乳酸脱氢酶(lactic dehydrogenase, LDH)及丙二醛(malondialdehyde, MDA)的影响, 探讨PTD4-SOD1对再灌注心肌的保护作用。方法 40只SPF级雄性SD大鼠, 体重(330±20)g, 按随机数字表法分为4组:假手术组(S组)、MI/RI组、SOD1蛋白组(SOD1组)、PTD4-SOD1融合蛋白组(PTD4-SOD1组), 每组10只。S组只穿线不结扎左冠状动脉前降支(left anterior descending, LAD), 其余3组均通过结扎与松解LAD的方法制备大鼠MI/RI模型, 缺血30 min, 再灌注120 min。S组、MI/RI组在再灌注的同时通过尾静脉分别注射0.9%氯化钠注射液(1 ml), SOD1组在再灌注的同时通过尾静脉注射SOD1蛋白500 μg(1 ml), PTD4-SOD1组在再灌注的同时通过尾静脉注射PTD4-SOD1 500 μg(1 ml)。再灌注结束时通过左心室采血5 ml, 后快速摘取心脏。分别使用免疫荧光检测PTD4-SOD1在大鼠MI/RI模型中的穿膜能力, 比色法检测CK、LDH的含量, 硫代巴比妥酸(thiobarbituric acid, TBA)染色法检测MDA的含量。结果免疫荧光结果显示, S组、MI/RI组、SOD1组均没有代表融合蛋白的荧光出现, PTD4-SOD1组出现荧光。与S组比较, 其余3组CK、LDH和MDA含量均明显升高, 差异有统计学意义(P<0.05);MI/RI组CK、LDH、MDA含量与SOD1组差异无统计学意义(P>0.05), PTD4-SOD1组CK、LDH、MDA含量较MI/RI组和SOD1组明显降低, 差异有统计学意义(P<0.05)。结论 PTD4与SOD1重组后表达纯化的PTD4-SOD1能显著降低血清CK、LDH和MDA值, 抑制脂质过氧化反应, 实现了对心肌细胞的保护作用。

• 单位
  十堰市太和医院