摘要

目的 建立黄芪休眠芽茎尖玻璃化超低温保存技术体系。方法 采用单因子实验设计,研究PVS2处理时间、休眠芽大小、冻存茎尖大小以及缺少装载和PVS2处理对黄芪休眠芽玻璃化超低保存成活率的影响。结果 将一年生黄芪种苗覆土后置于4℃低温锻炼20d左右,切取完整的休眠芽,剥至1~2 mm长的茎尖,先用含2 mol/L甘油+0.4 mol/L蔗糖的MS溶液装载20 min,再用PVS2处理50 min后投氮,恢复培养时从液氮中取出,38℃水浴化冻2 min,用无菌滤纸吸干表面溶液后接种到恢复培养基中(MS+2.0 mg/L BA+0.5 mg/L IAA+3%蔗糖+0.7%琼脂,pH5.8),先暗培养一周,再移到正常光照下进行培养,休眠芽冻存后的成活率高达100%。结论 建立了高效的黄芪休眠芽玻璃化超低温保存技术体系,为药用植物的种质资源保存开辟了一条新的途径。