晚期糖基化终末产物可通过调节V-ATPase a3与ClC-7影响破骨细胞的泌酸功能

作者：王海兴; 李子卿; 肖胤勃; 张紫机; 张阳春; 杨兴; 李朝红; 盛璞义

来源：中国组织工程研究, 2017, 21(12): 1826-1832.

• 糖基化终产物,高级
• 破骨细胞
• 组织工程
• 组织构建
• 骨细胞
• 糖基化终末产物
• 骨吸收功能
• 空泡型质子泵V-ATPase
• 氯离子通道ClC-7
• 吖啶橙染色
• 破骨细胞泌酸
• 国家自然科学基金

背景:晚期糖基化终末产物对破骨细胞骨吸收功能的影响存在争议,作者的前期研究表明晚期糖基化终末产物作用于破骨细胞前体可显著抑制骨吸收功能,但关于其对破骨细胞泌酸功能的影响尚不明晰。目的:探究晚期糖基化终末产物对破骨细胞泌酸功能的影响及其机制。方法:以15μg/L的RANKL对破骨细胞前体RAW 264.7进行定向诱导(正常组),实验组中另加入50-400 mg/L不等的晚期糖基化终末产物及对照用牛血清白蛋白(100 mg/L)。通过骨吸收实验验证晚期糖基化终末产物对骨吸收的抑制效应,并以吖啶橙染色观察晚期糖基化终末产物对破骨细胞泌酸功能的影响;进一步检测质子泵V-ATPase a3及氯离子通道ClC-7的表达情况,分析晚期糖基化终末产物影响破骨细胞泌酸的相关机制。结果与结论:(1)晚期糖基化终末产物组的骨吸收面积较正常组显著减少(P<0.05);(2)吖啶橙染色显示晚期糖基化终末产物组的红色荧光(620 nm)强度较正常组显著减少(P<0.05),抑制程度随着刺激浓度的增高而加重;(3)免疫细胞化学染色、蛋白质免疫印迹及PCR发现,晚期糖基化终末产物组的V-ATPase a3及ClC-7表达量均较正常组显著下降(P<0.05);(4)综上结果表明,晚期糖基化终末产物作用于破骨细胞前体可显著抑制破骨细胞的泌酸功能,其机制可能与晚期糖基化终末产物抑制了质子泵V-ATPase a3及氯离子通道ClC-7的表达相关。

• 单位
  中山大学附属第一医院; 中山大学中山医学院