科研之友
微信
新浪微博
Facebook
分享链接
摘要
二氢黄酮醇4-还原酶是将二氢黄酮醇转变为花色苷的关键酶，同时也是改变植物呈色的重要调控点。本研究在克隆得到日本蛇根草DFR2基因的基础上，将该基因插入原核表达载体pET32a，完成重组表达质粒pET32a-OjDFR2的构建，同时利用冻融法将该质粒转入大肠杆菌BL21感受态细胞中用于重组蛋白的表达。随后，在不同IPTG浓度、诱导温度及诱导时间下摸索BL21-pET32a-OjDFR2可溶性重组蛋白的最佳诱导表达条件，并通过洗脱、透析与浓缩完成重组蛋白的纯化。研究结果显示，该重组蛋白最佳诱导表达条件为：IPTG浓度0.2 mmol/L,15℃条件下诱导36 h。按照上述条件，制备并纯化获得了大量可溶性重组蛋白，为后续研究OjDFR2的酶学性质及生物学功能提供参考。
-
单位贵州师范大学; 生命科学学院
