摘要

目的检测碳青霉烯类敏感性下降革兰阴性杆菌的新德里金属β-内酰胺酶-1(NDM-1)基因,了解广州地区NDM-1超级细菌的流行情况。方法收集20112014年分离的碳青霉烯类敏感性下降革兰阴性杆菌105株,采用聚合酶链反应(PCR)扩增NDM-1基因保守序列初步筛查NDM-1基因,阳性菌株扩增NDM-1基因全序列,然后克隆至pUCm-T质粒后进行测序。结果肠杆菌科细菌对美罗培南、厄他培南、亚胺培南的耐药率分别为29.09%、50.91%、29.09%;鲍曼不动杆菌对美洛培南、亚胺培南全耐药;铜绿假单胞菌对美罗培南、亚胺培南的耐药率均为88.46%。有4株菌含NDM-1基因,包括肺炎克雷伯菌1株,大肠埃希菌2株,阴沟肠杆菌1株;克隆质粒pUCm-T-NDM-1经双酶切和测序证实构建成功。测序结果经BLAST比对后,发现4个克隆质粒的序列100%相同,与国内外发现的NDM-1序列也是100%一致。结论该地区革兰阴性杆菌存在产NDM-1酶株,其所携带的NDM-1基因全序列与国际上发现的完全一致。