内毒素/脂多糖通过PIM3对人中性粒细胞早期凋亡的作用

作者：宋明明; 李平; 金新源; 苏建东; 孙炳伟^*

来源：中华烧伤杂志, 2018, 34(11): 809-814.

• 脓毒症
• 脂多糖类
• 细胞凋亡
• 中性粒细胞
• PIM3

目的探讨内毒素/脂多糖(LPS)通过PIM3对人中性粒细胞早期凋亡的影响。方法采集1名健康成年志愿者静脉血, 分离出中性粒细胞, 采用随机数字表法分为对照组、LPS组、LPS+PIM447组。对照组不行任何处理, LPS组采用1 μL 1 μg/mL的LPS刺激, LPS+PIM447组在采用上述LPS刺激的前30 min, 用1 μL终物质的量浓度为5 μmol/L的PIM447预干预30 min。常规培养1 h后, 采用流式细胞仪检测细胞早期凋亡率, 二氢罗丹明123荧光探针法检测细胞的活性氧生成水平, 蛋白质印迹法检测细胞内PIM3的表达水平。常规培养2 h后, 琼脂糖细胞趋化模型检测细胞趋化距离。以上4个实验每组样本数均为5。对数据行单因素方差分析、SNK检验。结果 (1)LPS组细胞早期凋亡率[(0.891±0.012)%]与对照组[(1.351±0.183)%]相近(P>0.05), LPS+PIM447组细胞早期凋亡率[(82.057±0.121)%]明显高于LPS组(P<0.01)。(2)LPS组细胞趋化距离[(984±5)μm]明显小于对照组[(2 241±7)μm, P<0.01], LPS+PIM447组细胞趋化距离[(1 785±11)μm]明显大于LPS组(P<0.05)。(3)LPS组细胞活性氧生成水平较对照组明显增加(P<0.05), LPS+PIM447组细胞活性氧生成水平较LPS组明显降低(P<0.05)。(4)LPS组细胞PIM3表达水平(1.297±0.015)较对照组(0.789±0.021)明显增加(P<0.05), LPS+PIM447组细胞PIM3表达水平(0.731±0.011)较LPS组明显降低(P<0.05)。结论 LPS刺激可以降低人中性粒细胞的早期凋亡, 使用PIM447预干预可以明显增加LPS刺激后中性粒细胞的早期凋亡, 恢复趋化功能, 且很好地抑制活性氧的产生, 其机制可能与LPS促进PIM3的表达有关。

• 单位
  南京医科大学