芜菁花青素合成关键酶DFR基因启动子的克隆及功能分析

作者：许志茹; 马静; 崔国新; 李玉花

来源：园艺学报, 2014, 41(08): 1631-1641.

DOI：10.16420/j.issn.0513-353x.2014.08.011

• 芜菁
• 二氢黄酮醇4–还原酶基因
• 启动子
• 功能鉴定

在已经克隆的‘津田’芜菁和‘赤丸’芜菁二氢黄酮醇4–还原酶(DFR)基因的基础上,通过染色体步移法从两种芜菁基因组中克隆了BrDFR1和BrDFR2基因上游1 296和1 297 bp的启动子序列。生物信息学分析表明,启动子片段中包含TATA box、CAAT box、光调控元件、ABA应答元件、伤害应答元件、低温应答元件、防御与胁迫应答元件、MeJA应答元件等多个顺式作用元件。启动子BrDFR1P和BrDFR2P仅在15个核苷酸位点存在差异。将BrDFR1P和BrDFR2P分别连接到pCAMBIA1301植物表达载体上,构建Promoter::GUS载体,通过农杆菌介导遗传转化烟草。GUS组织化学染色检测表明,BrDFR1P和BrDFR2P均能驱动GUS基因表达。构建BrDFR1P和BrDFR2P的一系列缺失体,融合GUS基因后遗传转化烟草。染色结果表明,BrDFR1P和BrDFR2P缺失片段均具有相应的起始下游基因转录的活性特征。

• 单位
  东北林业大学; 林木遗传育种国家重点实验室; 生命科学学院