极端嗜热α-淀粉酶ApkA的高温活性和热稳定性的优化研究

作者：曾静; 郭建军; 袁林; 杨罡; 陈俊

来源：生物技术通报, 2017, 33(08): 192-198.

DOI：10.13560/j.cnki.biotech.bull.1985.2017-0172

• 极端嗜热α-淀粉酶
• Zn2+-结合位点
• 定点突变
• 高温活性
• 热稳定性

旨在获得高温活性和热稳定性提高的α-淀粉酶。通过向α-淀粉酶Apk A中引入目前已知的最稳定的α-淀粉酶PFA的Zn2+结合位点,获得Zn2+结合位点突变体ApkAds K152H/A166C。酶学性质分析表明,ApkAds K152H/A166C的高温活性和热稳定性明显提高,最适反应温度由90℃提高至100℃,对应的酶比活力为5 201.08 U/mg。ApkAds K152H/A166C于90℃的半衰期由5 h延长至10 h,于100℃的半衰期由7.5 min延长至80 min。重组α-淀粉酶中Zn2+含量测定结果显示ApkAds K152H/A166C结合了一个Zn2+。结果表明,向ApkA中引入Zn2+结合位点有利于提高其高温活性和热稳定性。

• 单位
  江西省科学院微生物研究所