广西金花茶根系丛枝菌根(AM)真菌染色方法探讨

作者:许诗萍; 高日芳; 张金莲; 宋娟; 李冬萍; 何苑皞*; 曾诗媛*; 陈廷速
来源:热带作物学报, 2023, 1-12.

摘要

金花茶(Camellia nitidissima)为山茶科山茶属植物,属于国家一级保护植物,具有很高的观赏价值及药用价值。但目前金花茶野生资源少,因此寻找高效的人工种植方法,快速繁殖金花茶优良种苗,进而扩大金花茶种植规模具有重要意义。丛枝菌根(Arbuscular mycorrhiza,AM)真菌能显著促进植物生长、增强植物抗逆性和抗病性;金花茶植株接种AM真菌,对金花茶种植有积极的影响。由于所有的AM真菌接种试验均涉及到根系菌根发育状况观察与侵染率测定,而目前AM真菌侵染根系观察及测定方法种类繁多,因此本文探究一种金花茶根系AM真菌侵染检测的最佳染色方法,更好地观察AM真菌对金花茶根系的侵染情况。本研究以金花茶健康植株根系为试验材料,探讨5种染色剂(苏丹红Ⅳ、酸性品红、苯胺蓝、台酚蓝、醋酸墨水)对金花茶根系AM真菌的染色效果。研究结果表明:5%醋酸墨水染色液的染色效果最佳,根皮层细胞内AM真菌的菌丝、泡囊、孢子等结构清晰可见,且能够明确分辨AM真菌与其他未知真菌,根的染色效果可以长久保存;苏丹红IV和酸性品红染色的AM真菌菌丝和泡囊和背景反差不明显,而且酸性品红染色效果保存时间短,不利于观察;苯胺蓝和台酚蓝的染色效果略次于醋酸墨水,且价格昂贵,实验成本高。后四种染色剂均是疑似致癌物,长期使用对操作人员的健康有非常大的安全隐患。醋酸墨水染色操作简便、毒性低、成本低廉、染色效果极佳,适用于金花茶根系AM真菌的染色和制片观察。研究结果为下一步金花茶菌根种苗的应用提供新的思路。