MACC1基因表达下调对卵巢上皮性癌细胞SKOV3顺铂敏感性的影响

作者：邓佑兴; 史惠蓉; 李霞; 张瑞涛

来源：中国妇幼保健, 2014, 29(04): 596-599.

• 结肠癌转移相关基因1(MACC1)
• 卵巢癌
• ERK
• 顺铂

目的:探讨通过RNA干扰技术沉默MACC1基因的表达对卵巢上皮性癌细胞SKOV3顺铂敏感性的影响及其可能机制。方法:前期构建的针对MACC1 mRNA的小发卡状RNA重组表达载体转染卵巢癌SKOV3细胞,获得MACC1基因表达下调的shRNA-MACC1-SKOV3细胞。RT-PCR及Western blot检测MACC1 mRNA和蛋白表达,并检测ERK1/2和p-ERK1/2蛋白含量的变化以及ERK1/2通路抑制剂PD98059对上述蛋白水平的影响。四甲基偶氮唑蓝法(MTT)检测shRNA-MACC1-SKOV3细胞顺铂敏感性变化。同时设置空白组(SKOV3细胞)和转染空质粒组(SKOV3/DDP-EGFP细胞)为对照组。结果:(1)shRNA-MACC1-SKOV3细胞的MACC1 mRNA和蛋白明显降低。(2)shRNA-MACC1-SKOV3细胞p-ERK1/2表达明显降低,在此基础上加入PD98059后p-ERK1/2表达改变更为明显。(3)shRNA-MACC1-SKOV3细胞的顺铂半数抑制浓度(IC50)为(20.420±1.437)μmol/L,明显低于空白组和转染空质粒组[分别为(28.168±0.899)和(27.071±1.229)μmol/L。结论:SKOV3细胞中MACC1基因表达下调导致细胞对顺铂的敏感性增加,可能与下游的ERK1/2通路受到抑制有关。

• 单位
  郑州大学第一附属医院