双重实时荧光聚合酶链式反应检测棘鳞蛇鲭和异鳞蛇鲭

作者：温智清; 阚式绂; 郑晓聪; 刘莹; 王津津; 史秀杰; 兰文升; 贾鹏; 刘荭^*

来源：中国食品卫生杂志, 2019, 31(06): 540-544.

DOI：10.13590/j.cjfh.2019.06.007

• 棘鳞蛇鲭
• 异鳞蛇鲭
• 双重实时荧光聚合酶链式反应

目的建立检测棘鳞蛇鲭(Ruvettus pretiosus, RP)和异鳞蛇鲭(Lepidocybium flavobrunneum, LF)两种油鱼的双重实时荧光聚合酶链式反应(PCR)方法。方法基于棘鳞蛇鲭和异鳞蛇鲭线粒体细胞色素氧化酶亚基Ⅰ(COⅠ)基因分别设计特异性引物和探针,并对方法进行灵敏度、特异性和重复性分析,建立双重实时荧光PCR方法。结果模板量在8.4×105～8.4×100 copies/μl范围内,方法具有良好的线性关系,棘鳞蛇鲭和异鳞蛇鲭的线性回归方程分别为y=-3.18x+41.0(R2=0.998 8)和y=-3.37x+44.5(R2=0.998 6),方法组内相对标准偏差(RSD)为0.29%～0.84%。其中,检测棘鳞蛇鲭的组内RSD为0.29%～0.84%,检测异鳞蛇鲭的组内RSD为0.29%～0.62%。方法最低检测限为16.8 copies/反应,并且从随机购买的50份鳕鱼样品中鉴定出油鱼成分棘鳞蛇鲭。结论本试验建立的双重实时荧光PCR方法能够特异性地鉴定出棘鳞蛇鲭和异鳞蛇鲭,具有实际应用潜力。

• 单位
  深圳海关动植物检验检疫技术中心; 深圳市检验检疫科学研究院