骨桥蛋白反义寡核苷酸抑制卵巢癌细胞SKOV3粘附侵袭的实验研究

作者：崔越宏; 刘天舒; 周宇红; 金文; 冯艺

来源：实用肿瘤杂志, 2008, (05): 415-420.

• 卵巢肿瘤
• 骨桥蛋白
• 寡核苷酸类,反义
• 细胞凋亡
• 肿瘤侵润
• 肿瘤标记,生物学
• 基因表达

目的研究骨桥蛋白(OPN)反义寡核苷酸(antisense oligonucleotide,ASODN)抑制人卵巢癌细胞株SKOV3粘附侵袭及诱导凋亡的作用。方法用脂质体将骨桥蛋白ASODN转染卵巢癌细胞SKOV3。实验分3组:对照组,随机序列寡核苷酸(random oligonucleotide,rODN)组和ASODN组。通过荧光定量RT-PCR、流式细胞仪检测法、黏附细胞计数法和Boyden小室法分别测定骨桥蛋白mRNA和细胞表面骨桥蛋白的蛋白表达及癌细胞黏附力、侵袭力的变化。Annexin V染色法、DNA ladder法和Hoechst染色法检测凋亡。结果转染后ASODN组骨桥蛋白mRNA的相对定量比值较对照组显著降低(1.95±0.81 vs 5.26±0.66,P<0.01);流式细胞仪检测骨桥蛋白表达结果显示,转染后平均荧光指数明显降低,细胞表面骨桥蛋白的蛋白表达下降(P<0.01);转染后ASODN组黏附力和侵袭力均较对照组显著下降(黏附细胞百分数值为16.97±1.60 vs 36.14±1.16,穿透聚碳酸酯膜细胞数为44.67±2.08 vs 83.67±4.51,P值均<0.01);经骨桥蛋白ASODN作用后SKOV3细胞发生凋亡。而rODN组上述各指标较对照组无明显变化。结论骨桥蛋白的表达与黏附侵袭能力密切相关,反义寡核苷酸能有效抑制卵巢癌细胞株SKOV3细胞骨桥蛋白基因的表达,从而抑制蛋白质的合成,降低其黏附侵袭能力,并能够诱导凋亡。

• 单位
  复旦大学附属中山医院