麦胚降血糖肽的分离纯化及鉴定

作者：颜辉; 张琦; 江明珠; 朱胜虎; 聂旭东; 余永建; 张佳鑫; 贾俊强; 熊孟

来源：食品科学, 2018, 39(20): 92-98.

• 麦胚
• 降血糖多肽
• α-葡萄糖苷酶
• 分离纯化
• 结构鉴定
• 动物实验

建立麦胚降血糖肽的分离纯化方法及鉴定活性多肽的结构组成。采用胰蛋白酶酶解麦胚蛋白,得到降血糖多肽,并进行降血糖动物实验。超滤获得高活性组分,离子交换吸附实验选择最佳的树脂,并对麦胚降血糖肽进行离子交换吸附分离,SephadexG-25和SephadexG-15分离,再经过反相高效液相色谱(reverse phase-high performance liquid chromatography,RP-HPLC)分离高活性成分。最后采用高效液相色谱-电喷雾-质谱(HPLC-electrospray ionization-massspectrometry,HPLC-ESI-MS)鉴定活性多肽的结构组成。结果显示酶解麦胚蛋白对α-葡萄糖苷酶的抑制性IC50为10.98 mg/mL,能够缓解糖尿病小鼠的症状。超滤获得分子质量小于5 kDa的高活性组分,IC50为1.60 mg/mL。732型阳离子交换树脂的分离效果最好,2.5%氨水的洗脱率为98.13%,通过动态离子交换吸附分离后,活性显著提高,IC50为0.30 mg/mL。通过SephadexG-25和SephadexG-15分离得到高活性组分,经RP-HPLC分离得到8个组分(峰),其中1号峰的活性和含量都最高,IC50为0.098 mg/mL。HPLC-ESI-MS结果显示m/z 274.45的丰度比较高,经离子碎片拼接,共有7种多肽,其中二肽有1种,三肽有6种。本研究对于开发具有降血糖功效的新型功能性食品有一定的作用。

• 单位
  江苏恒顺集团有限公司; 江苏科技大学