摘要
目的 探究TRPM7在胃癌组织中的表达及其对胃癌细胞凋亡和自噬的影响。方法 收集2018年1月至2021年6月在张家港市中医医院进行手术治疗的46例胃癌患者的肿瘤组织和癌旁组织标本,并选择胃黏膜上皮细胞株GES-1,以及胃癌细胞株MGC-803、SGC-7901、HGC-27和MKN-45作为研究对象。采用实时荧光定量PCR法检测TRPM7在胃癌组织、癌旁组织、GES-1细胞及各胃癌细胞株中的表达水平,分析TRPM7的表达水平与胃癌患者临床病理特征的关系。将TRPM7小干扰RNA(TRPM7-siRNA,设为si-TRPM7组)和阴性对照(siRNA-NC,设为si-NC组)转染至MGC-803细胞,将空白质粒(设为Vector组)和TRPM7过表达质粒(设为TRPM7组)转染至MKN-45细胞。采用流式细胞术检测各组细胞凋亡率,采用蛋白质印迹法检测各组细胞中LC3-Ⅱ和p62的表达水平,以及磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K)、蛋白激酶B(Akt)、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)磷酸化水平。结果 与癌旁组织比较,TRPM7 mRNA在胃癌组织中的表达水平较高,差异有统计学意义(P<0.001);与GES-1细胞比较,TRPM7mRNA在MGC-803、SGC-7901、HGC-27和MKN-45细胞中的表达水平较高,差异均有统计学意义(P均<0.001)。TRPM7的表达水平与胃癌患者的病理分期、TNM分期、淋巴结转移有关(P均<0.05)。与si-NC组比较,si-TRPM7组的MGC-803细胞凋亡率升高,LC3-Ⅱ表达水平降低,p62表达水平升高,PI3K、Akt、m TOR磷酸化水平降低,组间比较差异均有统计学意义(P均<0.001)。与Vector组比较,TRPM7组的MKN-45细胞凋亡率降低,LC3-Ⅱ表达水平升高,p62表达水平降低,PI3K、Akt、mTOR磷酸化水平升高,组间比较差异均有统计学意义(P均<0.001)。结论 TRPM7在胃癌组织中呈高表达,可能通过调控PI3K/Akt/mTOR信号通路抑制胃癌细胞凋亡和自噬。
-
单位张家港市中医医院