基于蛋白组学探讨哈蟆油对骨质疏松大鼠骨代谢调节作用机制

作者：李晓华; 仇广杰; 曹占鸿; 姜艳清; 李晶; 李宜平; 杨擎; 石晓征; 李娜; 曲晓波; 李银清^*

来源：中药药理与临床, 2021, 37(03): 103-108.

DOI：10.13412/j.cnki.zyyl.20210602.003

• 哈蟆油
• 蛋白质组学
• 骨质疏松
• 多肽体外标记定量技术
• 作用机制

目的:基于多肽体外标记定量技术(TMT)蛋白定量检测,研究哈蟆油调节大鼠骨代谢,防治绝经后骨质疏松作用。方法:采用蛋白裂解法提取大鼠股骨总蛋白,依次经过胰蛋白酶酶解、TMT试剂标记、HPLC分级、HPLC-MS联用技术鉴定蛋白,利用生物信息学分析方法进行差异表达蛋白注释、GO富集分析、通路富集分析和蛋白结构域富集分析,利用平行反应监测(PRM)技术验证典型特异表达蛋白。结果:蛋白质定量分析共鉴定到5 654个蛋白,其中注释到4 889个蛋白。与空白对照组比较,模型对照组参与富集度较高的信号通路中差异表达蛋白共22个(fold change>2.0,fold change <1/2.0,P<0.05),其中有6个蛋白发生表达上调,有16个蛋白发生表达下调。与模型对照组比较,哈蟆油0.075 g/kg组参与富集度较高的信号通路中差异表达蛋白共11个(fold change>2.0,fold change<1/2.0,P<0.05),其中有6个蛋白发生表达上调,有5个蛋白发生表达下调。这些差异蛋白重点参与了大鼠体内糖酵解/糖异生、细胞外基质(ECM)-受体相互作用、核糖体代谢、蛋白质消化吸收、脂肪酸降解、补体和凝血级联及心肌病、坏死症、百日咳、病毒病、红斑狼疮等疾病代谢途径。PRM实验验证肌钙蛋白I(Tnni1)、心肌肌钙蛋白C(Tnnc1)、丝氨酸蛋白酶的抑制剂(Serpina3k)、半乳糖凝集素(Galentin-1)及肌球蛋白轻链III(My13)蛋白表达趋势与TMT检测结果一致。结论:哈蟆油对骨质疏松大鼠骨代谢调节作用可能与Tnni1等11个差异表达蛋白相关,其中与Tnni1、Tnnc1、Serpina3k、Galentin-1及My13等5个蛋白密切相关。

• 单位
  吉林农业大学; 长春中医药大学