木薯MeVINV1基因的CRISPR/Cas9基因编辑载体构建及验证

作者：刘钊君; 王亚杰; 甄兴厚; 陆小花; 姚远; 李瑞梅; 刘姣; 胡新文; 郭建春

来源：分子植物育种, 2021, 20(02): 371-376.

• 木薯(Manihot esculenta Crantz)
• 液泡转化酶
• MeVINV1
• CRISPR/Cas9
• 脱靶效应

液泡转化酶(vacuolar invertase, VINV)是参与植物蔗糖代谢、器官发育的关键酶之一。木薯MeVINV1在块根发育及淀粉积累阶段的表达活跃，对该基因进行编辑敲除，将有助于解析MeVINV1在木薯块根淀粉积累过程中的作用。本研究构建了MeVINV1的CRISPR/Cas9基因编辑载体，转化木薯脆性胚性愈伤组织以验证载体的编辑效果。结果发现：转化后的样品中，MeVINV1基因靶点位置出现测序多峰，而未转化样品中没有多峰出现，表明本研究构建的基因编辑载体可对MeVINV1基因进行编辑；检测分析潜在脱靶位点的序列，发现未出现脱靶现象。该研究为获得MeVINV1基因的突变体，明确其在木薯块根发育及淀粉积累过程中的功能奠定了基础。

• 单位
  中国热带农业科学院热带生物技术研究所; 海南大学