摘要
目的在体外诱导脐血(umbilical cord blood)间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)向成骨细胞分化,研究在特定微环境下诱导脐血MSCs分化为成骨细胞的方法。方法由人脐静脉获得MSCs,采用密度梯度法分离培养MSCs,应用地塞米松、β-甘油磷酸钠、维生素C诱导,观察MSCs的形态变化,未诱导组作为平行对照。利用倒置光学显微镜、透射电镜、碱性磷酸酶染色等方法研究脐血MSC增殖和分化情况。RT-PCR检测脐血MSCs胞成骨诱导后骨形态发生蛋白2 mRNA的表达情况。结果在诱导培养微环境中的脐血MSCs向成骨细胞诱导分化后,长梭形细胞变成多角形、不规则形,局部细胞重叠生长,10 d后细胞外渐可见方形,高折光性的结晶颗粒,开始呈现成骨细胞的特点,茜素红及碱性磷酸酶染色阳性,骨形态发生蛋白-2 mRNA表达阳性。结论人脐带血MSCs可在体外诱导为成骨细胞,是研究骨组织工程的理想种子细胞。
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单位青岛大学附属医院; 青岛市中心医院