猪II型圆环病毒全基因组序列分析及其ORF1和ORF2基因的克隆与表达

作者：韩凌霞; 陈艳; 崔尚金; 王云峰; 仇华吉; 童光志

来源：中国预防兽医学报, 2004, (01): 13-16.

• PCV-2
• 原核表达
• 诊断抗原 PCV-2
• prokaryotic expression
• diagnostic antigen

猪II型圆环病毒(PCV＿2)的2个主要开放阅读框ORF1和ORF2分别编码病毒的复制酶Rep和结构蛋白Cap。本试验将分离株L株病毒感染PK15细胞系,提取总DNA并以其为模板,通过PCR分别扩增了全病毒基因组、完整的Rep和Cap基因,并克隆到pMD18T载体中,进行了序列测定。将Rep和Cap基因亚克隆到大肠杆菌表达载体pPROEXTMHT中,以融合蛋白的形式表达了这两种蛋白。根据文献报道,致病性的PCV＿2与无致病性的PCV1的型特异性抗原决定簇主要位于Cap基因的羧基端部分,本实验利用原核表达载体pGEX＿6p＿1融合表达了Cap基因羧基端423bp的片段。通过薄层扫描各重组菌诱导表...

• 单位
  兽医生物技术国家重点实验室; 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所