摘要
目的探讨细胞内基质金属蛋白酶2(MMP-2)基因过表达对大鼠胰岛β细胞株INS-1细胞功能的影响。方法采用基因重组技术将大鼠MMP-2cDNA插入真核表达载体pcDNA 3.1(+)构建大鼠MMP-2真核表达质粒,培养INS-1细胞。随机分为正常对照组,空质粒转染组及MMP-2质粒转染组。脂质体Lipofectmine 2000转染INS-1细胞,观察INS-1细胞内MMP-2基因和蛋白表达量变化,MMP-2酶活性变化,以及INS-1细胞凋亡情况与胰岛素分泌功能的变化。结果与正常对照组、空质粒转染组比较,MMP-2质粒转染组MMP-2mRNA表达增加(P均<0.05),蛋白表达水平和酶活性上调(P均<0.05);MMP-2质粒转染组细胞凋亡率(56.07±3.68)%高于正常对照组(33.70±6.53)%及空质粒转染组(38.02±5.60)%(P<0.05),而IRI(1.30±0.27)低于正常对照组(3.37±0.76)与空质粒转染组(2.90±0.84)(P<0.05)。结论细胞内MMP-2基因的过表达可引起胰岛β细胞凋亡增加,胰岛素分泌功能下降。
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单位上海交通大学医学院附属新华医院