摘要
研究旨在通过筛选高效木质素降解菌,优化其产酶过程,提高木质素降解率和秸秆降解率。试验以木质素为唯一碳源初筛,通过苯胺蓝-PDA培养基、愈创木酚-PDA培养基、碱性木质素降解率复筛,最终以在发酵培养基中木质素过氧化酶、锰过氧化酶、漆酶酶活为指标进行筛选,通过单因素和正交法进行固态发酵产酶优化。结果显示,试验筛选出1株高木质素降解率的菌株M20,经形态和内转录间隔区(ITS)序列分析初步确定为Aspergillus oryzae。在以油菜秸秆为基质的发酵培养基上进行产酶优化,秸秆与麸皮比例、发酵时间、氮源添加量为产木质素酶显著影响因子;正交试验确定油菜秸秆固体培养基最优条件为秸秆与麸皮比为2∶1、(NH4)2SO4添加量为3%、发酵4 d。在此条件下,优化后木质素过氧化酶酶活为1 796.74 U/g,锰过氧化酶酶活为146.78 U/g,漆酶3.979 U/g,比未优化的3种木质素降解酶分别提高了60.28%、45.14%、27.00%。研究表明,菌株M20在油菜秸秆生物降解方面具有较大的应用前景,可在一定程度上为秸秆资源化利用提供了新的微生物资源。
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单位生物工程学院; 四川轻化工大学