枯草芽胞杆菌异戊二烯酶ComQ的生物信息学分析及对生物膜形态的影响

作者：李伟; 吴静; 冯静静; 汪剑; 周梦洁; 胡汶松; Sokhna mbacke Gningue; 薛正莲; 赵世光; 钱森和; 王洲; 刘艳^*

来源：微生物学报, 2022, 62(02): 533-542.

DOI：10.13343/j.cnki.wsxb.20210206

• 枯草芽胞杆菌
• 生物信息学分析
• 生物膜
• 过表达
• 敲除

【目的】枯草芽胞杆菌ComQ是一种类异戊二烯生物合成酶。利用生物信息学预测分析了ComQ的生物学特性,对com Q基因进行过表达和敲除,构建突变菌,孔板发酵培养验证生物膜形态变化。【方法】运用NCBI (National Center for Biotechnology Information)网站里的Protein数据库获取ComQ蛋白氨基酸序列,通过在线生物信息学软件预测分析其生物学特征,包括其理化性质、信号肽、结构域、空间结构等。构建枯草芽胞杆菌BS168的com Q过表达及敲除菌株,利用孔板发酵培养验证生物膜生长性状。【结果】ComQ蛋白由299个氨基酸组成,理论相对分子质量约34 204.08 Da,无信号肽,无跨膜区,为稳定胞内蛋白。通过菌落PCR,验证枯草芽胞杆菌BS168突变菌构建成功。利用孔板发酵培养枯草芽胞杆菌BS168及突变菌株,验证ComQ蛋白对枯草芽胞杆菌生物膜的形态形成存在影响。两种突变菌株生物膜形态均与原始菌株存在差异。【结论】通过对ComQ蛋白的基本性质、关键氨基酸位点及蛋白结构预测分析,构建突变菌株,验证生物膜形态变化,为后续探究ComQ对枯草芽胞杆菌的生长代谢变化奠定了基础。

• 单位
  安徽工程大学