牛奶过敏原β-乳球蛋白抗体的制备及免疫检测方法的建立

作者：李亚璞; 麻云莲; 樊丹; 张小兵^*

来源：现代食品科技, 2018, 34(10): 225-230.

DOI：10.13982/j.mfst.1673-9078.2018.10.030

• β-乳球蛋白
• 酶联免疫吸附法
• 多克隆抗体
• 单克隆抗体

本文将牛奶过敏原β-乳球蛋白抗原分别免疫新西兰大白兔和BALB/c小鼠制备其多克隆抗体和单克隆抗体,并对所获得的抗体进行了效价等特性测定;采用蛋白A亲和层析法将多克隆抗体进行了纯化,采用辛酸-硫酸铵法对单抗细胞株3A7进行了纯化;实验建立了双抗体夹心的ELISA检测方法,并对一些蛋白样品进行了初步的检测。实验结果表明,所制备的抗β-乳球蛋白兔多克隆抗体效价达到了1:6.56×106;Western-blotting鉴定结果显示所制备的多克隆抗体能够与β-乳球蛋白特异性反应;3株单抗的效价均在106以上,纯化后多抗仅与酪蛋白有一定的交叉反应,而纯化后单抗与乳中主要蛋白及其它过敏原蛋白基本没有交叉反应,特异性很好;利用所建立的方法对一些蛋白样品进行检测,准确率100%。

• 单位
  河北省科学院生物研究所; 河北工业大学