TGF-β诱导及病毒感染获得iTreg细胞的方法学研究

作者：汤庆; 章文; 周春雷; 王松; 朱志峰; 徐琼; 李晋平; 王莉; 陆融; 林刚; 姚智

来源：天津医科大学学报, 2014, 19(05): 368-372.

• Foxp3
• 诱导性调节性T细胞
• TGF-β

目的:建立MSCV-Foxp3感染法和TGF-β诱导法获取诱导性调节性T淋巴细胞(iTreg)的方法,并初步探讨两种iTreg的作用机制异同。方法:分别用MSCV-Foxp3感染和TGF-β诱导获取iTreg,流式细胞术和PCR检测两种iTreg的产率和Foxp3mRNA表达,CFSE染色观察iTreg的免疫抑制作用。ELISA检测iTreg的IL-10和TGF-β分泌,PCR检测iTreg颗粒酶A和B的mRNA水平。结果:感染法和诱导法iTreg产率分别可达49.12%和41.08%,但前者Foxp3 mRNA表达高于后者(P<0.05)。两种iTreg均具有一定的免疫抑制活性,IL-10分泌水平较原始CD4+T细胞上升(P<0.05),但颗粒酶B在诱导组iTreg的表达显著高于感染组(P<0.05)。结论:病毒感染法与TGF-β诱导法均可成功获得具有免疫抑制功能的iTreg,但前者Foxp3 mRNA表达高于后者。两种iTreg发挥免疫抑制功能可能都有IL-10参与,而颗粒酶B可能只与诱导组iTreg有关。

• 单位
  天津医科大学; 基础医学院; 深圳市康哲药业有限公司