摘要

利用响应面法对牵牛子黑丑的总蛋白提取进行工艺优化并观察其抗肿瘤活性。采用单因素及响应面法,以牵牛子蛋白提取量为指标,考察料液比、温度和pH三个因素对蛋白质提取量的影响。在经过双酶解法、SephadexG-15凝胶层析后,利用MTT(噻唑蓝)实验观察多肽组分的抗肿瘤活性。响应面优化结果发现影响牵牛子总蛋白质提取的各因素主次顺序为料液比>温度>pH,且最佳提取工艺为:pH 8.0,料液比为1∶50,温度为57℃,牵牛子蛋白提取量为544.608±1.13 mg(n=3),与理论预测相对误差较小。MTT实验结果显示多肽组分GA和GB对人鳞状上皮舌癌细胞SCC9和SCC25活性有显著抑制作用,但对人乳腺癌细胞和肺癌人肺泡基底上皮细胞则没有明显抑制效果。研究结果显示:牵牛子蛋白提取工艺条件合理,其抗肿瘤活性的研究为后期治疗舌鳞状细胞癌临床药物的研发提供科学依据。