UHPLC-MS/MS测定大鼠尿液中环磷酰胺及其代谢产物浓度

作者：冯格; 陈力; 翟健秀; 高守红; 陈万生; 夏天一; 谢新芳; 熊筱娟; 张凤

来源：中国现代应用药学, 2017, 34(06): 800-805.

DOI：10.13748/j.cnki.issn1007-7693.2017.06.003

• 环磷酰胺
• 代谢产物
• 超高效液相色谱-串联质谱法
• 尿液

目的基于UHPLC-MS/MS建立测定给予高剂量环磷酰胺(cyclophosphamide,CTX)后大鼠尿液中CTX及其代谢产物脱氯乙基环磷酰胺(dechloroethylcyclophosphamide,DCCTX)、4-酮基环磷酰胺(4-Ketocyclophosphamide,4-Keto CTX)、羧基磷酰胺(carboxyphosphamide,CEPM)浓度的方法。方法大鼠尿液样品经10%甲醇水溶液直接稀释,离心后取上清液,采用UHPLC-MS/MS进行检测分析。色谱柱:Agilent poroshell SB-C18(2.1 mm×75 mm,2.7μm);流动相:甲醇-10 mmol·L-1乙酸铵水溶液,进行梯度洗脱,流速0.25 m L·min-1,柱温25℃。采用电喷雾离子源,以多重反应监测模式进行正离子检测。用于定量检测分析的离子对分别为:CTX:m/z 261.10→140.10;DCCTX:m/z 199.20→78.00;4-Keto CTX:m/z 275.10→142.00;CEPM:m/z 293.10→221.10;替硝唑(tinidazole,TNZ):m/z 248.10→121.10。结果 CTX及其代谢产物尿中浓度在402 000 ng·m L-1内线性关系良好(CTX、DCCTX、4-Keto CTX、CEPM的r2分别为:0.991 5,0.991 0,0.995 6,0.991 8),最低定量限均为40 ng·m L-1;日内、日间RSD分别为0.67%12.76%,1.30%11.92%;由内标归一化的基质因子计算RSD,结果为0.52%7.60%;该方法的提取回收率为74.00%102.70%(n=6),方法回收率为85.89%110.69%(n=5);测定成分和内标的稳定性均良好。结论该方法快捷、准确可靠、重复性好,适用于大鼠高剂量CTX后CTX及其代谢产物尿药浓度的测定及排泄研究。

• 单位
  生物工程学院; 宜春学院; 沈阳药科大学; 上海长征医院