钩端螺旋体LAg42膜蛋白基因的克隆及原核表达

作者：刘鱼; 鲍朗; 商正玲; 钟琪

来源：四川大学学报(自然科学版), 2007, 44(03): 702-706.

DOI：10.3969/j.issn.0490-6756.2007.03.052

• 钩端螺旋体
• lag42基因
• 克隆
• 表达

分别以问号状赖型钩体017株,56601株及双曲钩体PatocI株基因组为模板,PCR扩增目的基因lag42与质粒pET32a(+)构建重组原核表达质粒,在大肠杆菌BL21中诱导表达.结果显示不同毒力赖型钩体均能扩增出约1100 bp的片段,而PatocI株则未能扩增出目的片段;不同赖型钩体的lag42基因的同源性很高.融合表达质粒pET-lag42转化大肠杆菌BL21后,经IPTG诱导,表达出约62kDa的重组融合蛋白,用Western blotting证实其有良好的抗原性,纯化蛋白免疫新西兰大白兔,获得了高效价的抗体.

• 单位
  华西医学中心; 四川大学