摘要
本试验以T7、T8代转基因株系JN18-hrpZPsta-45为试验材料,运用常规PCR技术、Southern杂交及qRT-PCR技术对T7、T8代大豆株系进行分子检测和稳定性鉴定,随即以下胚轴侵染法为理论依据完成疫霉根腐病抗性鉴定,同时分析其抗病性。结果表明:终止子Nos、启动子35S、筛选标记Bar的目的条带和转化的目的基因在T7、T8代转基因株系中被全部测获;Southern印迹杂交证实:目的基因在大豆基因组中以单拷贝方式完成整合;qRT-PCR检测证实:植株籽粒、叶、茎、根全部有目的基因表达,T7代株系的根、茎、叶、籽粒相对表达量均值分别为2.45、1.73、2.52、1.91,T8代株系的根、茎、叶、籽粒相对表达量均值分别为3.22、2.04、3.46、2.75,证实茎中的表达量最低、叶中最高,以抗病性标准为依据展开对照可以获得如下抗病性鉴定结论:转、非转基因二者的抗病级别分别为高抗、中抗。
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