奶牛乳腺在不同机能状态下乳汁外泌体的异质性分析

作者:杨芳玲; 王玉; 吴帅帅; 王建发; 朱海鲸; 李陇平; 屈雷; 董书伟*
来源:农业生物技术学报, 2023, 31(10): 2098-2105.

摘要

乳房炎是影响奶牛(Bos taurus)产奶量最大的疾病,但目前尚无高效的防控方法,奶牛乳汁中的外泌体可能在乳房炎发生过程中有重要作用。为研究奶牛在健康、患隐性乳房炎和临床型乳房炎等不同的机能状态下,乳汁中外泌体有何变化,本研究采用超速离心法分离奶牛乳汁中的外泌体,通过纳米粒子追踪、透射电子显微镜和Western blot鉴定外泌体,并比较各组外泌体颗粒直径、数量、蛋白浓度及表面标记分子的差异。结果表明,各组中外泌体的颗粒大小接近,形态符合外泌体特征,组间无明显差异;Western blot结果显示,各组中外泌体分子标记蛋白分化抗原9 (cluster of differentiation 9, CD9)、CD81和肿瘤抑制基因101 (tumor susceptibility gene 101, TSG101)的检测结果均为阳性。隐性乳房炎组的外泌体颗粒最多,其次为临床型乳房炎组,均显著高于健康组(P<0.05);隐性乳房炎组外泌体蛋白含量最高,其次为临床型乳房炎组,两组均显著高于健康组(P<0.05)。本研究从奶牛乳汁中分离到了外泌体,其数量、蛋白含量和表面分子标记在乳腺不同机能状态下发生了较大的变化,表明外泌体可能在奶牛乳腺抗感染过程中有调节作用,为深入认识乳腺的天然免疫防御机制提供理论依据。