摘要
目的构建针对乙型肝炎病毒核心蛋白的小干扰RNA真核表达载体,并验证其干扰效果。方法设计针对HBV基因组(ayw亚型)HBc基因的小干扰RNA序列(位于2147 bp2165 bp序列),目的片段与载体成功连接后转入大肠埃希菌DH5ct,酶切及测序验证其正确性。最后以脂质体转入HepG2.2.15细胞中,检测其干扰效果。结果成功构建针对乙型肝炎病毒核心蛋白的小干扰RNA真核表达载体,并命名为pshRNA—HBc。酶切及测序验证正确,pshRNA—HBc对HepG2,2.15细胞中HBc表达具有特异性干扰效果。结论构建针对乙型肝炎病毒核心蛋白的小干扰RNA真核表达载体,为后续研究HBc的生物学功能奠定良好基础。
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单位中心实验室; 山东大学; 淄博市中心医院