携带CRISPR/Cas9的重组腺联病毒对伪狂犬病病毒感染小鼠的治疗效应

作者：李兆龙^*; 张惠芳; 丰志华; 方舟

来源：畜牧兽医学报, 2022, 53(03): 834-846.

• 猪伪狂犬病病毒
• CRISPR/Cas9
• 腺联病毒
• 治疗

猪伪狂犬病病毒(pseudorabies virus, PRV)是猪伪狂犬病的病原。目前，针对该病毒有较多成熟的商品化疫苗，但病毒变异频繁，因而在生猪养殖中伪狂犬病的发生仍然较为普遍。如何清除宿主体内野毒是防控该病的关键所在。应用腺联病毒携载CRISPR/Cas9系统，以小鼠为动物模型，针对PRV的TK基因、gE基因和VP16基因进行剪切，减弱PRV毒力和复制能力，以期清除小鼠体内的PRV。结果表明，成功构建带有CRISPR/Cas9表达系统及相应sgRNA的pX601重组质粒(pXTK、pXGE、pXVP16);并包装成具有基因编辑功能的AAV-gE、AAV-VP16和AAV-TK病毒；经细胞水平和小鼠的感染试验，证实该方法能明显降低细胞和小鼠体内的PRV载量，并且延长小鼠存活时间，提高小鼠成活率，该治疗结果与治疗次数呈正相关。该小鼠模型的研究结果为猪伪狂犬病的临床治疗提供了新的借鉴。

• 单位
  福建省农业科学院; 福建师范大学