牛环形泰勒虫病实时荧光PCR诊断方法的建立及初步应用

作者：郭庆勇; 王振宝; 何晓杰; 曹雯丽; 巴音查汗

来源：中国兽医学报, 2013, (09): 1369-1372.

DOI：10.16303/j.cnki.1005-4545.2013.09.018

• 牛环形泰勒虫病
• 实时荧光PCR
• TaqMan探针
• 诊断方法 Theilera annulata disease
• real-time PCR
• Taqman probe
• diagnostic method

参考GenBank中牛环形泰勒虫18SrRNA基因序列,设计合成1对特异性引物和TaqMan探针,通过优化反应参数,建立了检测牛环形泰勒虫的实时荧光PCR方法。研究结果表明,该检测方法最低可检测到10拷贝的核酸,比常规PCR敏感10倍;其组内变异系数<0.85%,组间变异系数<0.56%;对牛巴贝斯虫、双芽巴贝斯虫、伊氏锥虫等无荧光检测信号,与其他蜱传血液原虫无交叉反应;在47份被检样品中,实时荧光PCR和常规PCR的检出率分别为36.17%和25.53%。本研究建立的实时荧光PCR检测方法可用于牛环形泰勒虫病的诊断和分子流行病学调查。

• 单位
  伊犁职业技术学院; 伊犁出入境检验检疫局; 新疆农业大学