新分离呼肠病毒的空斑试验及病毒纯化

作者：苏裕心; 何君; 朱虹; 宋立华; 黄如统; 端青

来源：军事医学科学院院刊, 2005, (05): 22-24.

• 呼肠病毒
• 空斑试验
• RT-PCR
• 病毒纯化 reovirus
• plaque test
• virus purification

目的:建立新分离呼肠病毒(reovirus)的空斑技术,进行病毒纯化,为呼肠病毒生物学和分子生物学的研究奠定基础。方法:4株新分离呼肠病毒的早代毒种经L929细胞连续传代,当产生细胞病变后进行空斑试验,加营养琼脂培养6 d后加中性红,24 h内挑取空斑,扩增一次后做PCR鉴定。取呼肠病毒PCR阳性病毒进行第2次克隆纯化。结果:4株新分离呼肠病毒经L929细胞连续传2~4代,均能观察到明显的细胞病变。用10-3和10-4接种L929单层细胞,第6~7天均能产生空斑,空斑呈圆形,直径为0.2~1.0 mm,并分别测定其空斑滴度(PFU/m l)。两次纯化后进行PCR检测,呼肠病毒基因扩增阳性、脊髓...

• 单位
  病原微生物生物安全国家重点实验室; 军事医学科学院