摘要
目的研究甘露聚糖结合凝集素(mannan-binding lectin,MBL)对辅助性T细胞17(T helper cell 17,Th17)诱导分化的影响。方法通过MACS分选器从人新鲜脐带血液中分选获得CD4+T细胞,对照组用anti-CD3 McAb和anti-CD28 McAb活化CD4+T细胞并加入适当浓度的IL-6和TGF-β1作为诱导剂,在对照组的基础上加入不同浓度的MBL作为实验组,细胞培养72 h后,利用流式细胞术(FACS)检测各组中Th17细胞比例变化情况;Q-PCR分别检测未加MBL对照组和不同浓度MBL实验组Th17细胞核转录因子维甲酸孤儿受体-γt(retinoid-related orphan receptor-γ-t,ROR-γt)mRNA表达水平;ELISA检测各组细胞上清液中IL-17A的含量;FACS检测Th17细胞在MBL-/-小鼠和WT小鼠中的变化。结果 FACS分析表明,经体外72 h培养,与对照组相比,MBL能够显著降低Th17细胞的比例;Q-PCR结果显示,MBL能够显著降低RORγt mRNA的表达;ELISA结果显示,MBL能够显著降低IL-17A的表达水平;动物实验结果表明,与WT小鼠相比,MBL-/-小鼠CD4+RORγt+Th17细胞比例显著上升。结论 MBL能够抑制CD4+T细胞向Th17细胞诱导分化。
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单位新乡医学院; 基础医学院; 商丘医学高等专科学校