摘要
益生菌的肠道黏附是其实现长期肠道定植的关键因素。为增加外源性益生菌的肠道黏附性,对课题组前期分离所得党参多糖(CPP-2)采用羧甲基化和巯基化两步化学修饰法,制备巯基化党参多糖(sC-CPP-2)。通过体外黏附试验和激光共聚焦显微镜法分析在添加sC-CPP-2情况下肠黏液对鼠李糖乳杆菌(LGG)的黏附效果,利用党参多糖及其修饰组分与海藻酸钠形成的复合薄膜,间接验证sC-CPP-2对LGG的黏附性,并利用流变仪和经典拉伸实验检测sC-CPP-2与肠道黏液之间的相互作用关系。结果表明:羧甲基党参多糖(C-CPP-2)的取代度为0.588±0.026,sC-CPP-2中巯基含量为(279.50±5.97)μmol/g,C-CPP-2经巯基化修饰后处于巯基和羧基共存状态。sC-CPP-2表面巯基可与LGG表面蛋白质上的半胱氨酸形成二硫键,增加LGG的肠道黏附性。sC-CPP-2与肠黏液的最大分离力(MDF)为(101.82±5.78)mN,黏附总功(TWA)为(120.07±6.81)μJ,二者间相互作用力增强,表观黏度变大,黏合力显著增强。证实了sC-CPP-2能够起到连接LGG与肠黏液的中介作用,增强LGG的肠道黏附性,希望可为改善益生菌在肠道中的黏附定植作用提供参考。
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