利用基因工程抗体建立的新型双抗夹心ELISA法检测Cry1Ac毒素

作者:张留圈; 张霄; 刘媛; 徐重新; 张存政; 谢雅晶; 颜春荣; 寇莉萍; 刘贤金
来源:江苏农业学报, 2014, 30(03): 634-639.

摘要

为明确新型双抗夹心ELISA方法检测Cry1Ac毒素的效果,分别用纯化后的抗Cry1Ac单链抗体和anti-Cry1Ac兔多克隆血清(Anti-Cry1Ac-PAbs)作为捕获抗体和检测抗体,通过方阵滴定确定其最佳工作浓度,建立双抗夹心ELISA法。再用优化后的双抗夹心ELISA方法对检测Cry1Ac毒素的敏感性、特异性和回收率进行鉴定。结果表明,新型双抗夹心ELISA法最低检测限为0.91 ng/ml,线性检测范围为1.04 ng/ml3.49μg/ml。5种稻米中Cry1Ac毒素的平均回收率为69.42%87.95%,变异系数为1.19%6.50%。