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摘要
目的观察LYN对胃癌细胞迁移、侵袭等生物学行为的影响并分析其调控机制。方法 2018年2月至2019年12月, 通过蛋白印迹分析(Western blot)检测在承德医学院附属医院2017年至2018年间接受外科手术患者的LYN, 并临床收集的胃癌和癌旁组织样本中的表达差异;免疫组化检测分析LYN与临床病理指标间的关系;利用RNA干扰技术敲低LYN在胃癌细胞系AGS中的表达, Western blot检测转染效率;克隆形成和Transwell实验分别用于检测LYN敲低对AGS细胞增殖、迁移和侵袭的影响;Western blot检测相关信号通路相关蛋白;使用信号途径激活剂IGF-1进行拯救实验, 分析IGF-1是否可以逆转LYN敲低对AGS细胞增殖、迁移和侵袭的抑制作用, 对其调控机制进行研究。两组比较采用独立样本t检验。结果 LYN在胃癌组织中的的表达被显著上调;LYN在胃癌组织中的表达与患者的病理分级及分期显著相关;sh-LYN转染胃癌细胞可使LYN蛋白的表达量低于正常对照组(P<0.05);转染后, sh-LYN组的细胞克隆形成率为(25.2±1.8)%, 细胞侵袭数目为(51.67±3.53)个, 迁移细胞数目为(231.70±11.98)个, 与NC组比较, sh-LYN组细胞的增殖、迁移、侵袭受到抑制(t=3.850、3.437、4.450, P<0.05);Western blot检测结果, 与正常对照组比较, sh-LYN敲低LYN的表达之后, 可显著降低Wnt3和β-catenin的表达(t=7.058、5.617, P<0.05), 而且IGF-1逆转了LYN敲低对AGS细胞增殖、迁移和侵袭的抑制作用。结论敲低LYN可抑制胃癌细胞的增殖、迁移和侵袭, 并诱导胃癌细胞凋亡, 其过程与Wnt/β-catenin信号通路有关。
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单位承德医学院附属医院
