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摘要
目的研究Smad 6对人脑胶质瘤细胞增殖能力的影响及其机制。方法采用Western blot检测原代胶质瘤细胞核中Smad 6的表达水平。构建慢病毒介导的细胞核稳定过表达和敲减Smad 6的胶质瘤细胞株;CCK8细胞增殖和Ed U掺入增殖实验检测Smad 6对胶质瘤细胞增殖能力的影响;干细胞成球实验检测Smad 6对胶质瘤干细胞样细胞自我更新能力的影响。裸鼠皮下荷瘤模型检测Smad 6对胶质瘤细胞体内成瘤能力的影响;荧光素酶报告基因和Western blot检测Smad6对STAT3靶基因的调控,分析Smad 6对信号转导和转录激活因子3(STAT3)活性的调节作用。结果 Western blot和细胞增殖实验显示,原代胶质瘤细胞核中Smad 6表达水平与细胞增殖能力相关。成功构建Smad 6细胞核稳定过表达和敲减胶质瘤细胞株;核Smad 6过表达显著促进胶质瘤细胞的增殖和干细胞样细胞的自我更新能力,而Smad 6敲减则显著抑制胶质瘤细胞的增殖和干细胞样细胞的自我更新能力。细胞核Smad 6促进胶质瘤细胞中STAT3的转录调控活性及其靶基因的表达。结论胶质瘤细胞核中Smad 6通过调控STAT3的转录调控活性,促进胶质瘤细胞的增殖和干细胞样细胞的自我更新能力。
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