烟草atp9基因RNAi表达载体的构建及遗传转化

作者：谢丽娟; 陶瑶; 钟思荣; 吴凌敏; 聂亚平; 周玮; 刘栋; 王建革; 刘齐元

来源：江西农业大学学报, 2017, 39(01): 28-36.

DOI：10.13836/j.jjau.2017004

• 烟草
• atp9基因
• RNAi
• 表达载体构建
• 遗传转化

atp9基因是烟草的雄性不育相关基因。为研究atp9基因的功能及其在烟草雄性不育形成中的作用,根据atp9基因全长序列,设计特异性引物,扩增正、反义干扰片段,将长度为239bp的atp9基因的正、反向干扰片段分别连接到linker片段的两侧,最后插入到植物表达载体pCAMBIA1301中,成功地构建了atp9基因的RNAi表达载体。利用农杆菌介导法将其转化烟草保持系品种中烟90,结果证明atp9基因的RNAi表达载体已整合到中烟90基因组中。经抗性筛选以及分子检测最终获得41株转pCAMBIA1301-atp9-RNAi烟草植株,其中阳性烟草有20株,转化率为48.8%。研究结果为下一步验证atp9基因的功能及其在烟草雄性不育形成中的作用奠定了基础。

• 单位
  作物生理生态与遗传育种教育部重点实验室; 园林与艺术学院; 江西省作物生理生态与遗传育种重点实验室; 南昌职业学院; 江西农业大学; 湖南农业大学